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時(shí)間(jiān)分辨熒光免疫層析定量檢測技(jì)術(shù)平台
一、稀土元素發光特點
1、Stokes位移大(dà)
Stokes位移達200nm,很(hěn)容易分辨激發光和(hé)發射光,從而排除激發光幹擾。而普通(tōng)熒光物質熒光光譜的Stokes位移隻有(yǒu)幾十納米,激發光譜和(hé)發射光譜通(tōng)常有(yǒu)部分重疊,互相幹擾嚴重;
2、衰變時(shí)間(jiān)長
镧系元素與普通(tōng)的熒光團比較,镧系元素離子螯合物熒光的衰變時(shí)間(jiān)(decay time)長(10~2000us),為(wèi)傳統熒光的103~106倍。通(tōng)過時(shí)間(jiān)分辨,可(kě)極大(dà)地降低(dī)了本底熒光,實現了高(gāo)信噪比;
3、激發光譜寬而發射光譜窄
镧系螯合物激發光光譜較寬,大(dà)的激發波長在300~500nm,可(kě)通(tōng)過增加激發光能量來(lái)提高(gāo)靈敏度。而發射光譜帶很(hěn)窄,甚至不到10nm,可(kě)采用隻允許發射熒光通(tōng)過的濾光片,進一步降低(dī)本底熒光,狹窄的發射波段為(wèi)多(duō)次分析成為(wèi)可(kě)能。
二、熒光納米微球
與經典的時(shí)間(jiān)分辨熒光免疫分析方法DELFIA法不同,時(shí)間(jiān)分辨熒光免疫層析技(jì)術(shù)采用熒光納米微球作(zuò)為(wèi)标記物,每個(gè)微球中可(kě)包裹成千上(shàng)萬個(gè)熒光分子,大(dà)大(dà)提高(gāo)了标記效率,有(yǒu)效的提高(gāo)了靈敏度;同時(shí)納米熒光微球表面修飾有(yǒu)合适密度的羧基,用于與蛋白或抗體(tǐ)的共價偶聯,提高(gāo)标記物的穩定性。
三、時(shí)間(jiān)分辨熒光免疫層析(TRFILF)原理(lǐ)
當将含有(yǒu)待測抗原(抗體(tǐ))的樣品滴在加樣區(qū),待測樣品中的抗原(抗體(tǐ))與結合墊中的熒光納米微球标記的抗體(tǐ)(抗原)結合并通(tōng)過毛細作(zuò)用向前層析,當達到檢測區(qū)後,與檢測線上(shàng)固定的抗體(tǐ)(抗原)結合,形成微粒-抗體(tǐ)-抗原-抗體(tǐ)夾心複合物并被固定在檢測線上(shàng),而多(duō)餘的熒光微球标記物繼續向前層析,與固定在質控線二抗結合。反應結束後,用紫外光源(340nm)對檢測區(qū)掃描檢測,檢測線和(hé)質控線上(shàng)熒光納米微球發出高(gāo)強度的熒光(615nm),且衰變時(shí)間(jiān)也較長。利用延緩測量時(shí)間(jiān),待樣品基質中自然發生(shēng)的短(duǎn)壽命熒光(1-10ns)全部衰變後,再測量稀土元素的特異性熒光,這樣就可(kě)以完全排除特異本底熒光的幹擾。通(tōng)過檢測線和(hé)質控線熒光強度的強弱及其比值,即可(kě)分析出樣品中待測物的濃度。
四、時(shí)間(jiān)分辨熒光免疫層析優勢
✭ 靈敏度高(gāo),比金标、普通(tōng)熒光靈敏度高(gāo)2-3個(gè)數(shù)量級;
✭ 可(kě)定量檢測,根據內(nèi)置的标準曲線,可(kě)給出待測物的具體(tǐ)濃度;
✭ 标記物穩定,抗幹擾強,檢測結果重複性好;
✭ 操作(zuò)簡便,檢測時(shí)間(jiān)短(duǎn),可(kě)用于現場(chǎng)篩查;
✭ 成本便宜,性價比高(gāo);
技(jì)術(shù)服務
凱璟生(shēng)物通(tōng)過多(duō)年在檢驗原料方面的技(jì)術(shù)積累,目前形成原料、試劑、儀器(qì)三維一體(tǐ)的發展模式,能夠為(wèi)IVD側向層析法、免疫比濁、化學發光領域為(wèi)業內(nèi)人(rén)士提供技(jì)術(shù)支持服務,公司目前擁有(yǒu)原料、試劑、儀器(qì)研發團隊,能夠為(wèi)您提供多(duō)方位全方位、安全、有(yǒu)效的支持,為(wèi)國內(nèi)免疫檢測領域的共同發展貢獻一份力量。
技(jì)術(shù)服務內(nèi)容包括:
☛ 時(shí)間(jiān)分辨熒光免疫層析定量檢測技(jì)術(shù)平台的建立及産品開(kāi)發;
☛ 免疫比濁定量檢測技(jì)術(shù)平台的建立及産品開(kāi)發;
☛ 免疫層析耗材、緩沖體(tǐ)系、各種添加劑的篩選及優化方法;
☛ 抗原抗體(tǐ)的配對及篩選方法;
☛ 免疫層析用納米微球的篩選方法;
☛ 免疫層析讀數(shù)儀的性能介紹及選擇方法;
☛ 其它……
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